单克隆抗体（mAb）的应用彻底改变了医学领域，其能用来治疗曾经科学家认为无法治愈的多种疾病。从1975年开始，杂交瘤技术被广泛应用于单克隆抗体的发现、筛选和生产，在过去10年里，科学家们为临床研究制造了大量杂交瘤，并对其进行了验证和发展，其中mAb的形式和型别对于理解其在临床前模型中的表现非常重要。基因工程所产生的mAbs通常采用重组技术进行生产，其中的可变结构域能进行测序、并且克隆到质粒中，在瞬态系统中进行表达；但这些过程比较耗时、具有挑战性且成本高昂，会严重阻碍临床前的研究进程。

杂交瘤抗体测序当前研究中，研究人员使用一步式的CRISPR/同源性定向修复技术对杂交瘤进行了工程化修饰，随后其迅速产生了重组杂交瘤，分泌Fc格式的单克隆抗体，且能够自由插入首选标签或插入突变。研究人员制造出了能产生片段抗原结合（Fab）的杂交瘤，即通常与抗原结合的抗体位点，其C端带有位点特异性化学酶修饰和纯化的标记，研究者所制造出的杂交瘤能够分泌同型和既定种类的嵌合抗体，同时还能产生并不损害抗原特异性的Fc突变抗体。

随后研究人员从杂交瘤上清液中分离出了工程化的抗体，从而就能够在体内和体外来观察其预期的生化和免疫学特征，由于研究者的目标是靶向作用免疫球蛋白基因座的恒定结构域，因此CRISPR/HDR的方法能够适用于任何物种或同种型的杂交瘤。此前研究人员利用Fab片段来治疗特定的自身免疫性疾病，靶向作用不同的治疗性纳米药物并产生双特异性抗体，在获得Fab片段的常规技术中，科学家们无法为基因组安装有用的标签或突变，为了在当前工作中使用CRISPR/HDR来获得Fab分泌型杂交瘤，研究人员选择杂交瘤克隆NLDC-145来作为第一个靶点，其能够分泌特定的mAbs的，为了靶向作用克隆的重链基因座，研究者利用优化的引导RNA来指导Cas9蛋白质目标铰链区并产生双链断裂。为了修复双链断裂，研究人员设计出了一种HDR结构并插入了感兴趣的靶点，由于HDR的功率通常较低，因此研究人员丰富了含有含有供体构建物的细胞的能力，随后他们使用PCR技术鉴定了供体构建体的插入，从而确定了供体构建体能够整合到正确的基因组位置。